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ELISA臨床質(zhì)量評價管理

分析前質(zhì)控 
●人員培訓(xùn)實(shí)驗是人操作的，因此檢驗人員需經(jīng)過培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識： 
◎檢驗項目的基本原理（ELISA 原理）； 
◎臨床意義； 
◎熟悉檢測技巧，了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)； 
◎熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）； 
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識。 
◎某些特殊項目的檢測如抗HIV 等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。 
分析前質(zhì)控 
◎ELISA 原理：1971 年Engvall 等人把免疫組化的EIA 技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗發(fā)展為ELISA 技術(shù)。 
特點(diǎn)：在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑" 
酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，進(jìn)行信號放大； 
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程； 
靈敏度特異性相對較高。 
局限性：只能檢測到ng 水平 
精密度差（批內(nèi)CV15-20%）； 
線性范圍窄（一個數(shù)量級）； 
存在"HD-HOOK" 效應(yīng)。

ELISA 原理

●根據(jù)檢測目的和操作步驟不同有三種基本方法。 
●雙抗體（原）夾心法檢測抗原（體）的常見方法，應(yīng)用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原（適用于二價以上抗原,不能測小分子半抗原）。 
●間接法檢測抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。 
●競爭法檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)。

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